Окра́шивание по Маккиаве́лло – Здродо́вскому, модификация метода окрашивания по Маккиавелло, используется для диагностики микроорганизмов, имеющих морфологию риккетсий и вирусных включений. По классификации относится к сложным методам окраски микроорганизмов.

История метода

Павел Феликсович Здродовский, советский микробиолог и эпидемиолог, руководил исследованиями и профилактикой риккетсиозов на территории Советского Союза. В результате он установил, что риккетсии являются неподвижными, за исключением видов Rickettsia conorii и Rickettsia sibirica, плеоморфными грамотрицательными бактериоподобными микроорганизмами – паразитирующими на различных видах членистоногих. Во время своих работ он выяснил, что из-за высокого содержания в клеточной стенке липидов риккетсии плохо окрашиваются обычными анилиновыми красителями, поэтому Здродовский использовал для окрашивания модифицированный метод Маккиавелло. Он рекомендовал окрашивать их не фуксином Маккиавелло (0,25 % щелочной раствор фуксина), а обычным разведённым карболовым фуксином.

Использование метода для идентификации риккетсий

В России метод Здродовского широко распространён в лабораторной диагностике риккетсиозов.

Риккетсии характеризуются кислотоустойчивостью, что позволяет окрашивать их по методу Маккиавелло – Здродовского, даже при их внутриклеточном расположении. При сыпном тифе, вызываемом риккетсией Провачека (Rickettsia prowazekii), и клещевых риккетсиозах (Rickettsia sibiricа) окрашивание проводится на жидких образцах (крови больного, испражнениях клещей и слюне), а также на образце кожи больного.

При диагностике риккетсиозов в промышленных масштабах метод используется редко, т. к. имеет ряд недостатков. Например, его трудно использовать после транспортировки на замороженных образцах т. к. метод даёт хорошие результаты только при окрашивании свежих препаратов.

Суть метода

При использовании метода для окрашивания, препарат, предположительно содержащий риккетсии, тонким слоем наносят на стекло, фиксируют на пламени горелки и окрашивают разведённым карболовым фуксином в концентрации 10 г/л. Фуксин разводят в дистиллированной воде и наносят на стекло на 5 минут. Затем препарат слегка обесцвечивают, погружая на 1–3 секунды в слабую соляную кислоту в концентрации 0,01 %. Образец промывают водой и докрашивают в течение 30 секунд 1 % раствором водного метиленового синего. Раствор карболового фуксина готовят заранее и хранят при +4 в течение 48 ч.

Риккетсии окрашиваются карболовым фуксином в ярко-розовый или рубиново-красный цвет и не обесцвечиваются слабой кислотой. Другие клетки в образце (клетки ткани больного или другие микроорганизмы) обесцвечиваются и дополнительно окрашиваются метиленовым синим. Протоплазма клеток окрашивается в голубой, а ядра – в синий.