Гидроксила́зы (монооксигеназы), ферменты класса оксидоредуктаз; катализируют реакции присоединения к субстрату одного из двух атомов молекулы кислорода. Второй атом используется для окисления участвующих в реакции восстановленных форм никотинамидадениндинуклеотида (НАДН) и никотинамидадениндинуклеотидфосфата (НАДФН), а также восстановленного флавинмононуклеотида (ФМНН), флавинадениндинуклеотида (ФАДН) или тетрагидробиоптерина. Широко распространены в природе, особенно их много в надпочечниках млекопитающих, где они участвуют в окислении промежуточных продуктов обмена стероидных гормонов. Врождённое нарушение активности гидроксилазы, участвующей в гидроксилировании ароматического кольца фенилаланина, лежит в основе фенилкетонурии.