А́льфа-кетома́сляная кислота́ (α-оксомасляная кислота, 2-оксобутановая кислота), CH₃CH₂C(O)CO₂, монокарбоновая кетокислота. В природе существует как анион α-кетобутират. Молярная масса 102,089 г/моль, t_пл 30–32 °C, t_кип 85°C (при 21мм рт.ст.).

Альфа-кетомасляная кислота – бесцветное кристаллическое вещество или маслянистая жидкость (плотность 1,2 г/см³), хорошо растворимые в воде и этаноле, малорастворимые в диэтиловом эфире.

Константа диссоциации кислоты pKa 2,50.

В клетках млекопитающих α-кетобутират образуется при биосинтезе L-цистеина из L-метионина и L-серина. Промежуточный продукт этого пути L-гомосерин под действием гомосериндегидратазы (КФ 4.2.1.15) превращается в α-аминокротоновую кислоту, неферментативно переходящую в α-кетомасляную кислоту. К образованию α-кетомасляной кислоты приводит также реакция отщепления амино- и тиогрупп у другого промежуточного продукта, L-гомоцистеина, под действием гомоцистеиндесульфгидразы (КФ 4.4.1.2). Далее α-кетобутират путём окислительного декарбоксилирования α-кетокислот превращается в пропионил-производное кофермента A.

У бактерий α-кетобутират образуется из L-треонина под действием треонинаммиаклиазы (КФ 4.3.1.19) и участвует в биосинтезе L-изолейцина.